附件：天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則（2019年第74號）.doc

天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定試劑注冊
技術(shù)審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定試劑注冊申報資料的準備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門審評注冊申報資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進行充實和細化。

本指導(dǎo)原則是供申請人和審查人員使用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊審批等行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法也可以采用，但應(yīng)提供詳細的研究資料和驗證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標準體系及當(dāng)前認知水平下制定的，隨著法規(guī)、標準體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進行調(diào)整。

一、適用范圍

本指導(dǎo)原則適用于采用天門冬氨酸底物法原理對人血清或血漿中天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性進行體外定量測定的體外診斷試劑。其它方法學(xué)產(chǎn)品根據(jù)實際情況可以參考本指導(dǎo)原則的有關(guān)內(nèi)容。

依據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）、《食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔2013〕242號），天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定試劑管理類別為Ⅱ類，分類編碼為6840。

二、注冊申報資料要求

（一）綜述資料

綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性的說明、研究結(jié)果的總結(jié)評價以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容，應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）的相關(guān)要求。相關(guān)描述應(yīng)至少包含如下內(nèi)容：

1.產(chǎn)品預(yù)期用途：描述產(chǎn)品的預(yù)期用途、與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)癥背景情況，如臨床適應(yīng)癥的發(fā)生率、易感人群，相關(guān)的臨床或?qū)嶒炇以\斷方法等。

天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST)，舊稱谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT），是氨基轉(zhuǎn)移酶的一種，它催化天門冬氨酸和α-酮戊二酸的氨基轉(zhuǎn)移作用，形成L-谷氨酸和草酰乙酸。AST廣泛分布于人體各組織，主要分布在心肌，其次是肝臟、骨骼肌和腎臟。AST在細胞中分布于細胞質(zhì)和線粒體基質(zhì)中，其中大約80%的AST存在于線粒體內(nèi)，屬于細胞內(nèi)功能酶，這些細胞受損后，由于細胞膜通透性增加，胞漿內(nèi)的AST釋放入血，致使血清或血漿中AST水平升高。AST測定主要用于病毒性肝炎、阻塞性黃疸、心肌梗死的輔助診斷，如慢性肝炎、肝硬化和營養(yǎng)不良等均會引起血清或血漿中AST水平的升高。

2.產(chǎn)品描述：包括產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理，主要原材料的來源及制備方法，主要生產(chǎn)工藝過程及關(guān)鍵控制點，校準品、質(zhì)控品的制備方法以及校準品溯源和質(zhì)控品定值情況（如有）。

如產(chǎn)品組成中含有磷酸吡哆醛，需明確磷酸吡哆醛的作用及對檢測結(jié)果的影響。

3.有關(guān)生物安全性方面的說明：如試劑主要原材料中含有人源性材料須對有關(guān)傳染?。℉IV、HBV、HCV等）病原體檢測情況予以說明，并提供相關(guān)的證明文件。如含有其他動物源及微生物來源的材料，應(yīng)當(dāng)提供相應(yīng)的說明文件，證明其在產(chǎn)品運輸、使用過程中對使用者和環(huán)境是安全的，并對上述原材料所采用的滅活等試驗方法予以說明。

4.有關(guān)產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評價。

5.其他：包括同類產(chǎn)品在國內(nèi)外批準上市的情況、相關(guān)產(chǎn)品所采用的技術(shù)方法及臨床應(yīng)用情況、申請注冊產(chǎn)品與國內(nèi)外同類產(chǎn)品的異同等。

（二）主要原材料的研究資料（如需提供）

主要原材料的選擇、制備、質(zhì)量標準及試驗驗證研究資料；質(zhì)控品、校準品的原料選擇、制備、定值過程及試驗資料；校準品的溯源性文件，包括具體溯源鏈、試驗方法、數(shù)據(jù)及統(tǒng)計分析等詳細資料。

（三）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料（如需提供）

1.主要生產(chǎn)工藝介紹，可以圖表方式表示。簡要說明主要生產(chǎn)工藝中每個生產(chǎn)步驟需滿足的條件及關(guān)鍵質(zhì)控環(huán)節(jié)。

2.反應(yīng)原理介紹。

3.確定反應(yīng)所需物質(zhì)用量（校準品、樣本等）的研究資料。

4.確定反應(yīng)最適條件的研究資料。

5.其他：如基質(zhì)效應(yīng)、樣本稀釋倍數(shù)等。

（四）分析性能評估資料

分析性能評估資料是對產(chǎn)品整個研發(fā)過程的總結(jié)，應(yīng)提交對試劑進行的所有性能驗證的研究資料，包括具體研究方法、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計方法等詳細資料。

性能評估應(yīng)至少包括試劑空白吸光度、試劑空白吸光度變化率、線性區(qū)間、準確度、分析靈敏度、精密度、干擾試驗、其他影響檢測的因素等。

1.試劑空白吸光度和試劑空白吸光度變化率

用空白樣品在37℃、測試主波長340nm、1cm光徑條件下測試試劑，試劑空白吸光度應(yīng)不小于1.0。

試劑空白吸光度變化率應(yīng)不大于0.004/min。

2.線性區(qū)間

建立試劑線性區(qū)間所用的樣本基質(zhì)應(yīng)盡可能與臨床實際檢測的樣本相似，理想的樣本為分析物活性濃度達到預(yù)期測定上限的混合人源樣本，制備低活性濃度樣本時應(yīng)充分考慮稀釋對樣本基質(zhì)的影響。超出線性區(qū)間的樣本如需稀釋后測定，應(yīng)做相關(guān)研究，明確稀釋液類型及最大可稀釋倍數(shù)，研究過程應(yīng)注意基質(zhì)效應(yīng)影響，必要時應(yīng)提供基質(zhì)效應(yīng)研究有關(guān)的資料。線性區(qū)間上限至少應(yīng)達到500U/L，在線性區(qū)間內(nèi)，理論濃度與實測濃度的線性相關(guān)系數(shù)r應(yīng)不小于0.9900。

3.準確度

企業(yè)可按照實際情況采用下列方法對測量準確度進行評價。

3.1相對偏差

用參考物質(zhì)或有證參考物質(zhì)（CRM）和相應(yīng)的參考測量程序?qū)υ噭┻M行測試，重復(fù)測定3次，取測試結(jié)果均值，計算相對偏差，實測值與標示值的偏差在±15%內(nèi)。

或用由參考方法定值的高、低2個活性濃度的人源樣本（可適當(dāng)添加被測物，以獲得高活性濃度樣本）對試劑進行測試，每個樣品重復(fù)測3次，分別取測試結(jié)果均值，并計算相對偏差。

若有國家標準品、參考品更新或發(fā)布，應(yīng)優(yōu)先采用國家標準品、參考品進行相對偏差的測試。

3.2方法學(xué)比對

可采用普遍認為質(zhì)量較好的已上市同類試劑作為參比試劑，與擬申報試劑同時檢測一批樣本，從測定結(jié)果間的差異了解擬申報試劑與參比試劑間的差異。以比對方法測定，擬申報試劑與參比試劑相關(guān)系數(shù)r應(yīng)不小于0.9900。

參考國際或國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的文件的方法，用不少于40例在測定范圍內(nèi)的不同活性的人源樣本進行測試。

3.3回收試驗

在人源樣品中加入一定體積標準品或校準品溶液（標準品或校準品溶液體積與人源樣品體積比應(yīng)不會產(chǎn)生基質(zhì)的變化，加入標準品或校準品溶液后樣品總活性濃度必須在試劑線性區(qū)間內(nèi)）或純品，進行檢測并計算回收率，回收率應(yīng)在90%～110%內(nèi)。

4.分析靈敏度

用已知活性濃度的樣本進行測試，記錄在試劑規(guī)定參數(shù)下的吸光度變化，換算為單位濃度的吸光度變化率。

5.批內(nèi)精密度

在重復(fù)性條件下，用高、低值質(zhì)控品測試同一批號試劑，重復(fù)測試至少10次，分別計算測量值的平均值和標準差，計算變異系數(shù)，批內(nèi)精密度應(yīng)不大于5.0%。

如為凍干粉試劑，用同一批號的20個待檢試劑分別測定高、低值質(zhì)控品，并計算20個測量值的平均值和標準差；用該批號的1盒待檢試劑重復(fù)測試同一質(zhì)控品20次，計算結(jié)果均值和標準差，計算凍干粉試劑瓶間差的變異系數(shù)，瓶間差（凍干粉）應(yīng)不大于5.0%。

6.批間精密度

用3個不同批號的試劑分別測試同一個質(zhì)控品，每個批號測試3次，分別計算每批3次測定的均值，并計算相對偏差，應(yīng)不大于10.0%。

7.干擾試驗

對樣本中常見的干擾物質(zhì)進行檢測，如膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯等。方法為對模擬添加樣本分別進行驗證，樣本量選擇應(yīng)體現(xiàn)一定的統(tǒng)計學(xué)意義，說明樣本的制備方法及干擾試驗的評價標準，確定可接受的干擾物質(zhì)極限濃度，被測物濃度至少應(yīng)包括其醫(yī)學(xué)決定水平的濃度。

8.校準品溯源及質(zhì)控品賦值（如適用）

應(yīng)參照GB/T 21415-2008 《體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》的要求溯源，并提供校準品溯源性說明及質(zhì)控品賦值說明。提供企業(yè)（工作）校準品及試劑盒配套校準品定值及不確定度計算記錄，提供質(zhì)控品賦值及其靶值范圍確定的記錄。

9.其他需注意問題

對于適用多個機型的產(chǎn)品，應(yīng)提供產(chǎn)品說明書【適用儀器】項中所列的所有型號儀器的性能評估資料。

如有多個包裝規(guī)格，需要對不同包裝規(guī)格之間的差異進行分析或驗證，如不同包裝規(guī)格產(chǎn)品間存在性能差異，需要提交采用每個包裝規(guī)格產(chǎn)品進行的分析性能評估資料。如不同包裝規(guī)格之間不存在性能差異，需要提交包裝規(guī)格之間不存在性能差異的詳細說明，具體說明不同包裝規(guī)格之間的差別及可能產(chǎn)生的影響。

測試樣本類型如包括血清和血漿樣本，則應(yīng)對二者進行相關(guān)性研究以確認二者檢測結(jié)果是否完全一致或存在某種相關(guān)性（如系數(shù)關(guān)系）。對于血漿樣本，企業(yè)應(yīng)對不同的抗凝劑進行研究以確認最適的抗凝條件以及是否會干擾檢測結(jié)果。

性能評估時應(yīng)將試劑和校準品、質(zhì)控品作為一個整體進行評價，評估整個系統(tǒng)的性能是否符合要求。

（五）參考區(qū)間確定資料

應(yīng)提交建立參考區(qū)間所采用樣本來源及詳細的試驗資料。應(yīng)明確參考人群的篩選標準，研究各組（如性別、年齡等）例數(shù)應(yīng)符合統(tǒng)計學(xué)要求。

若引用針對中國人群參考區(qū)間研究的相關(guān)文獻，應(yīng)明確說明出處，并使用臨床樣本進行驗證。研究結(jié)果應(yīng)在說明書【參考區(qū)間】項中進行相應(yīng)說明。

（六）穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容，申報試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。試劑穩(wěn)定性研究主要包括效期穩(wěn)定性、開封穩(wěn)定性、復(fù)溶穩(wěn)定性（凍干粉適用）、運輸穩(wěn)定性等，企業(yè)可根據(jù)實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體方法及過程。應(yīng)提供至少3批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的穩(wěn)定性研究資料。

企業(yè)可用加速試驗進行穩(wěn)定性等相關(guān)研究，但加速穩(wěn)定性試驗不能用于推導(dǎo)產(chǎn)品有效期，除非是采用給予大量的穩(wěn)定性研究數(shù)據(jù)建立的推導(dǎo)公式。

適用樣本的穩(wěn)定性主要包括室溫保存、冷藏或冷凍條件下的有效期驗證，適用冷凍保存的樣本應(yīng)對凍融次數(shù)進行評價。

試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內(nèi)容的研究結(jié)果均應(yīng)在說明書【儲存條件及有效期】和【樣本要求】兩項中進行詳細說明。

（七）臨床評價資料

此項目已經(jīng)列入《關(guān)于新修訂免于進行臨床試驗醫(yī)療器械目錄的通告》（國家藥品監(jiān)督管理局通告2018年第94號）中免于進行臨床試驗的體外診斷試劑目錄。根據(jù)體外診斷試劑臨床評價的相關(guān)要求，申請人可按照《免于進行臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價資料基本要求（試行）》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2017年第179號）要求進行臨床評價。如無法按要求進行臨床評價，應(yīng)進行臨床試驗，臨床試驗的開展、方案的制定以及報告的撰寫等均應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)及《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求。

1.免于進行臨床試驗的臨床評價

1.1基本要求

1.1.1產(chǎn)品臨床評價由申請人自行或委托其他機構(gòu)或?qū)嶒炇以谥袊硟?nèi)完成，試驗過程由申請人進行管理，試驗數(shù)據(jù)的真實性由申請人負責(zé)。境外申請人可通過其在中國境內(nèi)的代理人，開展相關(guān)臨床評價工作。

1.1.2申請人可根據(jù)產(chǎn)品特點自行選擇試驗地點完成樣本檢測，檢測地點的設(shè)施、試驗設(shè)備、環(huán)境等應(yīng)能夠滿足產(chǎn)品檢測要求。

1.1.3申請人應(yīng)在試驗前建立合理的臨床評估方案并遵照執(zhí)行。

1.1.4實驗操作人員應(yīng)為專業(yè)技術(shù)人員。

1.1.5評價用樣本應(yīng)為來源于人體的樣本，樣本來源應(yīng)可追溯。評價用樣本（病例）原始資料中應(yīng)至少包括以下信息：樣本來源（包括接收采集記錄）、唯一且可追溯的編號、年齡、性別、樣本類型、樣本臨床背景信息。

1.1.6檢測完成后對產(chǎn)品的臨床性能評價結(jié)果進行總結(jié)，形成臨床評價報告，并作為臨床評價資料在注冊時提交。其他臨床評價相關(guān)資料如試驗方案、原始記錄等由申請人保管，保管期限10年。

1.2申請人可以選擇以下兩種途徑之一。

1.2.1與境內(nèi)已上市同類產(chǎn)品進行比較研究試驗，證明兩者具有等效性。應(yīng)選擇目前臨床普遍認為質(zhì)量較好的產(chǎn)品作為參比試劑，同時應(yīng)充分了解參比試劑的技術(shù)信息，包括方法學(xué)、臨床預(yù)期用途、主要性能指標、校準品的溯源情況、推薦的參考區(qū)間等，應(yīng)提供已上市產(chǎn)品的境內(nèi)注冊信息及說明書。

1.2.2與參考方法進行比較研究試驗，考察待評價試劑與參考方法的符合率/一致性。應(yīng)選擇參考實驗室進行研究，參考實驗室應(yīng)具有中國合格評定國家認可委員會（CNAS）認可的相關(guān)檢測資質(zhì)。

1.3試驗方法

試驗方法的建立可參考相關(guān)方法學(xué)比對的指導(dǎo)原則，并重點關(guān)注以下內(nèi)容：

1.3.1樣本要求

選擇涵蓋預(yù)期用途和干擾因素的樣本進行評價研究，充分考慮試驗人群選擇、疾病選擇等內(nèi)容，樣本應(yīng)能夠充分評價產(chǎn)品臨床使用的安全性、有效性。

樣本數(shù)量應(yīng)采用合理的統(tǒng)計學(xué)方法進行計算，應(yīng)符合統(tǒng)計學(xué)要求。可選擇總樣本量不少于40例并分別采用待評價試劑和參比試劑/參考方法進行雙份測定的方式，其中參考區(qū)間以外樣本應(yīng)不少于50%，亦可選擇總樣本量不少于100例并分別采用待評價試劑和參比試劑/參考方法進行單次測定的方式。實驗前應(yīng)設(shè)定臨床評價性能指標的可接受標準，如果比較研究試驗結(jié)果無法達到預(yù)設(shè)標準，則應(yīng)適當(dāng)擴大樣本量進行評價。

產(chǎn)品應(yīng)注重醫(yī)學(xué)決定水平量值附近樣本的選擇，并涵蓋檢測范圍。如涉及需分層統(tǒng)計等復(fù)雜情況，應(yīng)結(jié)合實際情況選擇適當(dāng)?shù)臉颖玖窟M行充分的臨床評價。

評價用的樣本類型應(yīng)與注冊申請保持一致。對于具有可比性的不同樣本類型，如血清和血漿樣本，可在分析性能評估中對樣本適用性進行研究，或在臨床評價中對每種樣本類型分別進行符合統(tǒng)計學(xué)意義數(shù)量的評估。

1.3.2試驗要點

在試驗操作的過程中應(yīng)采用盲法。待評價試劑和參比試劑/參考方法應(yīng)平行操作，整個試驗應(yīng)有內(nèi)部質(zhì)量控制。

產(chǎn)品試驗檢測周期至少5天，以客觀反映實際情況。

擴大樣本量和延長實驗時間將提高試驗的可靠性，申請人應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)臉颖玖窟M行充分的臨床評價。

1.3.3數(shù)據(jù)收集和處理

對于擬申報產(chǎn)品，應(yīng)首先進行離群值觀察，離群值的個數(shù)不得超過限值。若未超限，可刪除離群值后進行分析；若超出限值，則需合理分析原因并考慮糾正措施，必要時重新收集樣本進行分析。離群值分析和處理方法應(yīng)有依據(jù)。

申請人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特點選擇合適的統(tǒng)計學(xué)方法，統(tǒng)計結(jié)果應(yīng)能證實待評價試劑相對于參比試劑/參考方法檢測結(jié)果無明顯偏倚或偏倚量在允許誤差范圍內(nèi)。

1.4.臨床評價報告

臨床評價報告應(yīng)對試驗設(shè)計、試驗實施情況和數(shù)據(jù)分析方法等進行清晰的描述。應(yīng)至少包括如下內(nèi)容：

1.4.1基本信息，如產(chǎn)品名稱、申請人名稱及聯(lián)系方式、試驗時間及地點等。

1.4.2試驗設(shè)計，詳細說明參比試劑/方法選擇、樣本入組和排除標準、樣本量要求、設(shè)盲要求、統(tǒng)計分析方法的選擇等內(nèi)容。

1.4.3試驗實施情況，具體包括：

樣本選擇情況，包括例數(shù)、樣本分布等。樣本例數(shù)應(yīng)詳細說明計算方法及依據(jù)。臨床評價所用產(chǎn)品信息，如評價用試劑、參比試劑/方法、配合使用的其他試劑/儀器的產(chǎn)品名稱、生產(chǎn)企業(yè)、規(guī)格/型號、批號等。試驗過程描述。試驗管理，包括參加人員、質(zhì)量控制情況、數(shù)據(jù)管理、出現(xiàn)的問題及處理措施等。數(shù)據(jù)分析及評價結(jié)果總結(jié)，根據(jù)確定的統(tǒng)計方法對檢測數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，對產(chǎn)品的臨床性能進行合理評價。評價數(shù)據(jù)表，應(yīng)以附件形式對入組的樣本情況進行匯總描述，應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：可溯源樣本編號、樣本基本信息、樣本類型、評價用試劑和參比試劑/方法檢測結(jié)果、樣本臨床背景信息或臨床診斷信息（如適用）等。評價報告應(yīng)由申請人/代理人簽章。

1.5其他評價資料

除以上臨床評價報告外，對擬申報產(chǎn)品臨床性能進行評價的相關(guān)文獻，可作為補充臨床評價資料提交。文獻的檢索、篩選和分析請參照《醫(yī)療器械臨床評價技術(shù)指導(dǎo)原則》的文獻檢索要求。

2.臨床試驗

2.1研究方法

選擇境內(nèi)已批準上市的臨床普遍認為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為參比試劑，同時應(yīng)充分了解所選擇產(chǎn)品的技術(shù)信息，包括方法學(xué)、臨床預(yù)期用途、主要性能指標、校準品的溯源情況、推薦的參考區(qū)間等。采用待評價試劑與之進行對比試驗研究，證明本品與已上市產(chǎn)品等效。

2.2臨床研究單位的選擇

應(yīng)選擇至少兩家取得資質(zhì)的臨床試驗機構(gòu)內(nèi)進行臨床試驗，臨床試驗機構(gòu)應(yīng)當(dāng)具備開展臨床試驗的條件。臨床研究單位試驗操作人員應(yīng)有足夠的時間熟悉檢測系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉評價方案。在整個試驗中，待評價試劑和對比試劑都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗數(shù)據(jù)的準確性及可重復(fù)性。

2.3倫理要求

臨床試驗必須符合赫爾辛基宣言的倫理學(xué)準則，必須獲得臨床試驗機構(gòu)倫理委員會的同意，如該臨床試驗對受試者幾乎沒有風(fēng)險，可經(jīng)倫理委員會審查和批準后免于受試者的知情同意。

2.4臨床試驗方案

臨床試驗實施前，研究人員應(yīng)從流行病學(xué)、統(tǒng)計學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗醫(yī)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計科學(xué)合理的臨床研究方案。各臨床研究機構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)保持一致，且保證在整個臨床試驗過程中遵循預(yù)定的方案實施，不可隨意改動。整個試驗過程應(yīng)在臨床試驗機構(gòu)的實驗室內(nèi)并由本實驗室的技術(shù)人員操作完成。

試驗方案中應(yīng)確定嚴格的病例納入/排除標準，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床研究都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。在試驗操作過程中和判定試驗結(jié)果時應(yīng)采用盲法以保證試驗結(jié)果的客觀性。各研究單位選用的試驗機型應(yīng)在試劑（盒）適用機型范圍內(nèi)，以便進行合理的統(tǒng)計學(xué)分析。另外，待評價試劑的樣本類型應(yīng)與產(chǎn)品說明書一致，如果選擇了對比試劑適用樣本類型以外的樣本，則應(yīng)采用其他方法對額外的樣本類型另行驗證。

2.5研究對象選擇

臨床試驗應(yīng)選擇具有特定癥狀/體征人群作為研究對象。企業(yè)在建立病例納入標準時，應(yīng)考慮到不同人群（包括年齡、性別、地域等）是否存在差異，盡量覆蓋各類適用人群。在進行結(jié)果統(tǒng)計分析時，建議對各類人群分別進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。

研究總體樣本數(shù)不少于200例，應(yīng)充分考慮對病理值樣本的驗證。樣本中待測物濃度應(yīng)盡可能覆蓋待評價試劑線性區(qū)間或臨床意義范圍，且樣本分布應(yīng)相對均衡。

樣本應(yīng)明確抗凝劑的要求、存貯條件、可否凍融、干擾物質(zhì)的影響以及避免使用的樣本等。試驗中，盡可能使用新鮮樣本，避免貯存。如無法避免使用貯存樣品時，注明貯存條件及時間，在數(shù)據(jù)分析時應(yīng)考慮其影響。

如果聲稱同時適用于血清和血漿樣本，那么血清（或血漿）的試驗例數(shù)參照上述要求，還應(yīng)對二者進行相關(guān)性研究以確認二者檢測結(jié)果是否完全一致或存在某種相關(guān)性（如系數(shù)關(guān)系），其例數(shù)應(yīng)符合統(tǒng)計學(xué)要求。建議在至少2家（含2家）臨床試驗機構(gòu)開展總樣本數(shù)不少于100例的臨床試驗。

2.6統(tǒng)計學(xué)分析

對臨床試驗結(jié)果的統(tǒng)計應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計方法，如相關(guān)分析、線性回歸、絕對偏倚/偏差及相對偏倚/偏差分析等。對于對比試驗的等效性研究，最常用是對待評價試劑和參比試劑兩組檢測結(jié)果的相關(guān)及線性回歸分析，應(yīng)重點觀察相關(guān)系數(shù)（r值）或判定系數(shù)（R2）、回歸擬合方程（斜率和y軸截距）等指標，并對其進行假設(shè)檢驗。結(jié)合臨床試驗數(shù)據(jù)的正/偏態(tài)分布情況，建議統(tǒng)計學(xué)負責(zé)人選擇合理的統(tǒng)計學(xué)方法進行分析，統(tǒng)計分析應(yīng)可以證明兩種方法的檢測結(jié)果無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。在臨床研究方案中應(yīng)明確統(tǒng)計檢驗假設(shè)，即評價待評價試劑與參比試劑是否等效的標準。

2.7臨床試驗總結(jié)報告撰寫

臨床試驗報告應(yīng)該對試驗的整體設(shè)計及各個關(guān)鍵點給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對整個臨床試驗實施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進行條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計分析方法。建議在臨床總結(jié)報告中對以下內(nèi)容進行詳述。

2.7.1臨床試驗總體設(shè)計及方案描述

臨床試驗的整體管理情況、臨床研究單位選擇、臨床主要研究人員簡介等基本情況介紹。

病例納入/排除標準、不同人群的預(yù)期選擇例數(shù)及標準。樣本類型，樣本的收集、處理及保存等。統(tǒng)計學(xué)方法、統(tǒng)計軟件、評價統(tǒng)計結(jié)果的標準。

2.7.2具體的臨床試驗情況

待評價試劑和參比試劑的名稱、批號、有效期及所用機型等信息。

對各研究單位的病例數(shù)、人群分布情況進行總合，建議以列表或圖示方式給出具體例數(shù)及百分比。

質(zhì)量控制，試驗人員培訓(xùn)、儀器日常維護、儀器校準、質(zhì)控品運行情況，對檢測精密度、質(zhì)控品回收（或測量值）、抽查結(jié)果評估。

具體試驗過程，樣本檢測、數(shù)據(jù)收集、樣本長期保存等。

2.7.3統(tǒng)計學(xué)分析

數(shù)據(jù)預(yù)處理、對異常值或離群值的處理、研究過程中是否涉及對方案的修改。對數(shù)據(jù)進行初步的統(tǒng)計描述，將計算出的統(tǒng)計指標與統(tǒng)計表、統(tǒng)計圖相結(jié)合，全面描述資料的數(shù)量特征及分布規(guī)律（反映分布特征，以便進行統(tǒng)計分析）。

定量值相關(guān)性，用回歸分析驗證兩種試劑結(jié)果的相關(guān)性，以y=a+bx和R2的形式給出回歸分析的擬合方程，其中：y是待評價試劑結(jié)果，x是參比試劑結(jié)果，b是方程斜率，a是y軸截距，R2是判定系數(shù)（通常要求R2≥0.95），同時應(yīng)給出b的95%（或99%）置信區(qū)間，定量值結(jié)果應(yīng)無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。

2.7.4討論和結(jié)論

對總體結(jié)果進行總結(jié)性描述并簡要分析試驗結(jié)果，明確本次臨床試驗評價是否有需特別說明的事項，最后得出臨床試驗結(jié)論。

（八）產(chǎn)品風(fēng)險分析資料

申請人應(yīng)考慮產(chǎn)品壽命周期的各個環(huán)節(jié)，從預(yù)期用途、與安全性有關(guān)的特征、已知及可預(yù)見的危害等方面的判定以及對患者風(fēng)險的估計進行風(fēng)險分析，應(yīng)符合YY/T 0316-2016《醫(yī)療器械風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》的要求。

（九）產(chǎn)品技術(shù)要求

產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》和《關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）的相關(guān)規(guī)定。該產(chǎn)品已有行業(yè)標準YY/T 1198-2013《天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒（IFCC法）》發(fā)布，技術(shù)要求應(yīng)不低于行業(yè)標準的要求。

1.產(chǎn)品型號/規(guī)格及其劃分說明

明確產(chǎn)品型號/規(guī)格及其劃分說明。

對同一注冊單元中存在多種型號和/或規(guī)格的產(chǎn)品，應(yīng)明確各型號及各規(guī)格之間的所有區(qū)別。

2.性能指標

產(chǎn)品性能指標應(yīng)至少包括外觀、裝量（液體試劑適用）、空白吸光度、空白吸光度變化率、線性區(qū)間、準確度、分析靈敏度、精密度（批內(nèi)精密度和批間精密度）、穩(wěn)定性等，以上指標應(yīng)至少符合YY/T 1198-2013《天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒（IFCC法）》的要求。另外需特別關(guān)注以下內(nèi)容：

2.1產(chǎn)品如為凍干粉，還應(yīng)包含批內(nèi)瓶間差、復(fù)溶穩(wěn)定性。

2.2穩(wěn)定性

對到期樣品進行檢測，方法同各項目要求。

效期穩(wěn)定性：生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)規(guī)定產(chǎn)品的有效期。試劑在規(guī)定的貯存條件下保存至有效期末，產(chǎn)品的性能應(yīng)符合外觀、裝量、空白吸光度、空白吸光度變化率、線性區(qū)間、準確度、分析靈敏度、批內(nèi)精密度的要求（即除批間精密度外的所有要求）。

熱穩(wěn)定性不能用于推導(dǎo)產(chǎn)品有效期，除非是采用給予大量的穩(wěn)定性研究數(shù)據(jù)建立的推導(dǎo)公式。

凍干粉（如有）應(yīng)同時進行復(fù)溶穩(wěn)定性試驗，復(fù)溶后放置到企業(yè)聲稱的復(fù)溶有效期末，產(chǎn)品性能應(yīng)符合除批間精密度外的所有要求。

2.3校準品和質(zhì)控品（如有）

至少應(yīng)包括外觀、裝量（液體試劑適用）、準確度、均一性、穩(wěn)定性。凍干粉應(yīng)包含批內(nèi)瓶間差、復(fù)溶穩(wěn)定性。

（十）產(chǎn)品注冊檢驗報告

首次申請注冊的產(chǎn)品應(yīng)提交符合要求的注冊檢驗報告。如有國家標準品、參考品發(fā)布，應(yīng)采用相應(yīng)的國家標準品、參考品進行注冊檢驗。

（十一）產(chǎn)品說明書

說明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、檢驗方法、檢驗結(jié)果的解釋以及注意事項等重要信息，是指導(dǎo)實驗室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對檢驗結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)。因此，產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。產(chǎn)品說明書的格式應(yīng)符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）的要求，下面對天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定試劑說明書的重點內(nèi)容進行詳細說明，以指導(dǎo)注冊申報人員更合理地完成說明書編制。

產(chǎn)品說明書內(nèi)容原則上應(yīng)全部用中文進行表述；如含有國際通用或行業(yè)內(nèi)普遍認可的英文縮寫，可用括號在中文后標明；對于確實無適當(dāng)中文表述的詞語，可使用相應(yīng)英文或其縮寫。

1.【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：產(chǎn)品名稱由三部分組成，即被測物名稱、用途、方法或原理。參考YY/T 1227-2014《臨床化學(xué)體外診斷試劑（盒）命名》的要求命名。例如：天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒（天門冬氨酸底物法），名稱中不能出現(xiàn)樣本類型及定量等內(nèi)容。

2.【包裝規(guī)格】

2.1應(yīng)與產(chǎn)品技術(shù)要求中所列的包裝規(guī)格一致。

2.2注明裝量或可測試的樣本數(shù)，如××mL、××測試/盒。

2.3注明各包裝規(guī)格的數(shù)量，如20mL×2。

3.【預(yù)期用途】應(yīng)包括以下幾部分內(nèi)容：

3.1說明用于體外定量測定人血清和/或血漿中天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的活性。

3.2說明與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)癥及背景情況，說明相關(guān)的臨床或?qū)嶒炇以\斷方法等。

4.【檢驗原理】

詳細說明檢驗原理、方法，必要時可采用圖示或反應(yīng)方程式的方法描述。例如：L-天門冬氨酸+α-酮戊二酸  AST  草酰乙酸+L-谷氨酸，草酰乙酸+NADH+H+  MDH    L-蘋果酸+NAD++H2O。

應(yīng)詳細說明參與反應(yīng)的底物、酶、產(chǎn)物及反應(yīng)條件。

5.【主要組成成分】

5.1說明試劑（盒）包含組分的名稱、數(shù)量、比例或濃度等信息，如果對于正確的操作很重要，應(yīng)提供其生物學(xué)來源、活性及其他特性。添加了磷酸吡哆醛的體系，需在成分中明確磷酸吡哆醛。對于多組分試劑盒，明確說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換，如可互換，還需提供相應(yīng)的性能驗證資料。

5.2試劑盒內(nèi)如包含校準品和/或質(zhì)控品，應(yīng)說明其主要組成成分及其生物學(xué)來源，校準品應(yīng)注明其定值及溯源性（具有批特異性的校準品還應(yīng)注明濃度范圍區(qū)間），溯源性至少應(yīng)寫明溯源到的最高級別，包括標準物質(zhì)編號。質(zhì)控品應(yīng)注明靶值范圍，如靶值范圍為批特異，可注明批特異，并附單獨的靶值單。

5.3對于產(chǎn)品中不包含，但對該試驗必需的試劑組分，說明書中應(yīng)列出此類試劑的名稱、純度，提供稀釋或混合方法及其他相關(guān)信息。

6.【儲存條件及有效期】

6.1對試劑的效期穩(wěn)定性、開封穩(wěn)定性、復(fù)溶穩(wěn)定性（如適用）等信息作詳細介紹，包括環(huán)境溫濕度、避光條件等。

6.2不同組分保存條件及有效期不同時，應(yīng)分別說明。產(chǎn)品有效期以其中效期最短的為準。

注：保存條件不應(yīng)有模糊表述，如“室溫”，應(yīng)明確貯存溫度，如2℃~8℃，有效期12個月。穩(wěn)定期限應(yīng)以月或日或小時為單位。

7.【適用儀器】

說明可適用的儀器，并寫明具體適用儀器的型號。

8.【樣本要求】

重點明確以下內(nèi)容：

8.1樣本采集：說明采集方法及樣本類型，如有血漿樣本，應(yīng)注明對抗凝劑的要求。

8.2樣本處理及保存：樣本處理方法、保存條件及期限、運輸條件，冷藏/冷凍樣本檢測前是否需恢復(fù)室溫及可凍融次數(shù)，對儲存樣本的添加劑要求等，以上內(nèi)容應(yīng)與樣本穩(wěn)定性的研究結(jié)果一致。

9.【檢驗方法】詳細說明試驗操作的各個步驟，包括：

9.1試驗具體操作步驟及結(jié)果計算方式。

9.2試劑配制方法、注意事項。

9.3試驗條件：溫度、時間、儀器波長等以及試驗過程中的注意事項。

9.4校準：校準品的使用方法、注意事項、校準曲線的繪制。應(yīng)注明推薦的儀器校準周期。

9.5質(zhì)量控制：質(zhì)控品的使用方法、對質(zhì)控結(jié)果的必要解釋以及推薦的質(zhì)控周期等。

10.【參考區(qū)間】

10.1應(yīng)注明常用樣本類型的正常參考區(qū)間。產(chǎn)品是否添加磷酸吡哆醛在此處應(yīng)予以注明。

10.2簡要說明參考區(qū)間確定的方法。

10.3建議注明以下字樣“由于地理、人種、性別及年齡等差異，建議各實驗室建立自己的參考區(qū)間”。

11.【檢驗結(jié)果的解釋】

說明可能對試驗結(jié)果產(chǎn)生影響的因素；說明在何種情況下需要進行確認試驗。

若超過線性區(qū)間上限的高濃度樣本可稀釋后測定，則應(yīng)說明樣本的最大可稀釋倍數(shù)、稀釋溶液等信息。

12.【檢驗方法的局限性】

12.1說明檢測結(jié)果僅供臨床參考，不能單獨作為確診或排除病例的依據(jù)。

12.2說明該檢驗方法由于哪些原因會使測量結(jié)果產(chǎn)生偏離，或測量結(jié)果還不能完全滿足臨床需要。如：干擾（膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯等）等。

13.【產(chǎn)品性能指標】

產(chǎn)品性能指標應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求。說明該產(chǎn)品主要性能指標，應(yīng)至少包括：試劑空白吸光度、試劑空白吸光度變化率、線性區(qū)間、準確度、分析靈敏度、精密度（批內(nèi)精密度和批間精密度）、校準品/質(zhì)控品性能（如適用）等。

14.【注意事項】應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

14.1本試劑的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。

14.2使用不同生產(chǎn)商的試劑對同一份樣本進行檢測，檢測結(jié)果可能會存在差異。

14.3如無確切的證據(jù)證明其安全性，對所有樣本和反應(yīng)廢棄物都應(yīng)視為傳染源對待，提示操作者采取必要的防護措施。

14.4試劑中含有的化學(xué)成分如接觸人體后會產(chǎn)生不良的影響，應(yīng)明確給予提示。

15.【標識的解釋】

如有圖形或符號，請解釋其代表的意義。

16.【參考文獻】

注明引用參考文獻，其書寫應(yīng)清楚、易查詢且格式規(guī)范統(tǒng)一。

17.【基本信息】

參照《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的相關(guān)內(nèi)容編寫。

18.【醫(yī)療器械注冊證編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號】

注明該產(chǎn)品的注冊證書編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號。

19.【說明書核準日期及修改日期】

注明該產(chǎn)品說明書的核準日期。如曾進行過說明書的變更申請，還應(yīng)該同時注明說明書的修改日期。

三、審查關(guān)注點

（一）產(chǎn)品技術(shù)要求中性能指標的設(shè)定及檢驗方法是否符合相關(guān)國家標準、行業(yè)標準的要求。產(chǎn)品技術(shù)要求的格式是否符合《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）的相關(guān)規(guī)定。

（二）產(chǎn)品說明書的編寫內(nèi)容及格式是否符合《醫(yī)療器械說明書和標簽管理規(guī)定》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第6號）、《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）的要求。

（三）分析性能評估指標及結(jié)果是否滿足本指導(dǎo)原則中各指標驗證的要求。

（四）參考區(qū)間確定使用的方法是否合理，數(shù)據(jù)統(tǒng)計是否符合統(tǒng)計學(xué)的相關(guān)要求，結(jié)論是否和說明書聲稱一致。

（五）試劑的穩(wěn)定性研究方法是否合理，穩(wěn)定性結(jié)論是否和說明書聲稱一致。

（六）臨床試驗采用的樣本類型及病例是否滿足試劑聲稱的預(yù)期用途，樣本量及臨床研究單位的選擇、對比試劑的選擇、統(tǒng)計方法及研究結(jié)果、臨床方案及報告撰寫的格式等是否符合《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號）對相關(guān)內(nèi)容的規(guī)定。

（七）產(chǎn)品風(fēng)險分析資料的撰寫是否符合YY/T 0316-2016《醫(yī)療器械風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》的要求。

四、編寫單位

山東省食品藥品審評認證中心。